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植物组培培养基-有机化合物(organic compound)
发表时间:2018-8-2 11:29:18 阅读:3391

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1、碳水化合物  

       糖在组培中的作用是提供C源并维持一定的渗透压,无论是哪种培养基配方均需加入一定量的糖,适宜的糖浓度对器官的发生很重要,不同的品种及外植体的诱导和分化,需要不同种类及不同浓度的糖,葡萄糖、果糖、蔗糖、可溶液性淀粉都可以作为组培的碳源,但通过对20多种糖作为碳源对不同植物的愈伤组织形成和生长的研究表明,对多数植物来讲,蔗糖和葡萄糖是良好的碳源,使用浓度一般为2%~3%,常用3%,即配制一升培养基称取30g蔗糖,有时可用2.5%。在诱导花药愈伤组织或胚培养时,往往采用4%-15%的高浓度。在实际应用中,用白糖代替蔗糖,未见明显的差异,大规模生产时从经济和节约的角度出发,白糖的使用更为广泛。

       由于糖具有维持渗透压的功效,所以及时转移材料到新鲜的培养基上也是非常重要的,否则会引起萎蔫和死亡。在香石竹的组培中当糖用量提高时,一方面会增加生产成本,另一方面随着糖浓度的增加,香石竹的生长受到抑制,浓度越高,抑制作用越强,当糖浓度达6%-8%时,嫩梢叶片开始翻卷增厚,呈现明显的形态异常,并出现较轻的萎蔫状,并伴有玻璃化发生;浓度达9%-11%时,培养20d,嫩梢开始死亡,腋生梢的发生量也随糖浓度的增加而减少,3%时为1.9个,5%时为1.4个,7%时为0.9个。同样,高浓度的糖也会抑制百合产生小鳞茎,糖浓度为3%时,茎尖外植体可以100%的产生小鳞茎,在9%时,28个茎尖只有3个产生了小鳞茎,其余的形成愈伤组织。

       不同糖类对生长的影响不同。从各种糖对水稻根培养的影响来看,以葡萄糖效果最好,果糖和蔗糖相当,麦芽糖差一些。不同植物不同组织的糖类需要量也不同,实验时要根据配方规定按量称取,不能任意取量。高压灭菌时,会使一部分蔗糖发生分解生成葡萄糖和果糖,制定配方时要给予考虑

2、维生素(vitamin)

       维生素类化合物在植物细胞里主要是以各种辅酶的形式参与多种代谢活动,对生长、分化等有很好的促进作用。维生素对植物新陈代谢过程的影响很大,它对形态发生的影响主要是由于影响到基础的生物化学代谢而产生的。虽然大多数的植物细胞在培养中都能合成所必需的维生素,但在数量上,还明显不足,通常需加入一种到数种维生素,以便获得最良好的生长。组培上常用的主要有VB1(盐酸硫胺素)、VB6(盐酸吡哆醇)、Vpp(烟酸)、Vc(抗坏血酸)、有时还使用生物素、叶酸、VB12等。一般用量为0.1-1.0 mg·L-1。有时用量较高。VB1对愈伤组织的产生和生活力有重要作用,VB6能促进根的生长,Vpp与植物代谢和胚的发育有一定关系。Vc有防止组织变褐的作用。许多植物能自行合成必需的维生素,在营养需求未知时,加入酵母提取物的主要目的也是在于补充维生素。

3、肌醇  (myo-inosltol)

       肌醇又叫环己六醇,在糖类的相互转化中起重要作用。通常可由磷酸葡萄糖转化而成,还可进一步生成果胶物质,用于构建细胞壁。肌醇与6分子磷酸残基相结合形成植酸,植酸与钙、镁等阳离子结合成植酸钙镁,植酸可进一步形成磷脂,参与细胞膜的构建。使用浓度一般为50-100 mg·L-1,适当使用肌醇,能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用,对细胞壁的形成也有作用。

4、氨基酸(almino acide) 

       氨基酸类是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸。有时应用水解乳蛋白或水解酪蛋白,它们是牛乳用酶法等加工的水解产物,是含有约20种氨基酸的混合物,用量在10-1000mg/L之间。甘氨酸能促进离体根的生长,对植物组织培养物的生长也有良好的促进效果,通常用量为2-3 mg·L-1。丝氨酸和谷氨酰胺有利于花药胚状体或不定芽的分化。水解酪蛋白(CH)和水解乳蛋白(LH)也是多种氨基酸的混合物,对胚状体或不定芽或多胚的分化有良好的促进作用,通常用量为500 mg·L-1。酪氨酸可不同程度的替代水解酪蛋白或水解乳蛋白的作用。但是由于它们营养丰富,极易引起污染。如在培养中无特别需要,建议不要使用。

5、腺嘌呤

       许多研究报告指出腺嘌呤及其硫酸盐具有促进芽分化的良好效果,对出芽难的植物可以试用,它是合成细胞分裂素的前提之一,所有细胞分裂素都含有腺嘌呤,或者说腺嘌呤带有不同侧链及其碱基,就构成了不同种类的细胞分裂素,因此,它可能在植物组织分化时形成细胞分裂素而起作用。

6、天然复合物  

       此类化合物其成分比较复杂,大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。它对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用,但对器官的分化作用不明显。它的成分大多不清楚,所以非必需一般不建议使用。

(1)、椰乳 

       椰乳是椰子的液体胚乳。它是使用最多、效果最大的一种天然复合物。一般使用浓度在10%—20%,与其果实成熟度及产地关系也很大。它在愈伤组织和细胞培养中有促进作用。在马铃薯茎尖分生组织和草莓微茎尖培养中起明显的促进作用,但茎尖组织的大小若超过1mm时,椰乳就不发生作用。

(2)、香蕉  

       一般是使用打碎的香蕉泥,用量为150-200ml/L。用黄熟的小香蕉,加入培养基后变为紫色。对pH值的缓冲作用大。主要在兰花的组织培养中应用,对发育有促进作用。

(3)、马铃薯  

       马铃薯去掉皮和芽后,加水煮30min,再经过过滤,取其滤液使用,用量为150-200g/L,对pH值缓冲作用也大。添加后可得到健壮的植株。

(4)、其他 

       酵母提取液(YE)(0.01%-0.05%),主要成分为氨基酸和维生素类;麦芽提取液(0.01%~0.5%)、苹果和番茄的果汁、黄瓜的果实、未熟玉米的胚乳等,遇热较稳定,大多在培养困难时使用,有时有效。

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